大同市實時熒光定量PCR儀研發(fā)
發(fā)布時間:2023-04-16 01:29:51
大同市實時熒光定量PCR儀研發(fā)
動物疫病包括動物傳染病、寄生蟲病。動物傳染病,即由病原體侵入動物體內(nèi),使動物產(chǎn)生具有一定潛伏期和臨床癥狀并具有傳播性 的動物疫病,如口蹄疫、雞瘟、牛肺疫、炭疽、布魯氏菌病、狂 犬病等。動物寄生蟲病,即由寄生蟲寄生在動物體內(nèi)或體表引起 的疾病,如豬囊蟲病、旋毛蟲病、鉤端螺旋體病、血吸蟲病、疥瞞等。根據(jù)動物疫病對養(yǎng)殖業(yè)生產(chǎn)和人體健康的危害程度,我國還 將動物疫病分為下列三類:對人畜危害嚴重、需要采取緊急、嚴 厲的強制預防、控制、撲滅措施的為一類疫??;可造成重大經(jīng)濟 損失、需要采取嚴格控制、撲滅措施,防止疫情擴散的為二類疫 ??;常見多發(fā)、可能造成重大經(jīng)濟損失、需要控制和凈化的為三 類疫病。

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熱啟動 Taq 酶的應用:PCR 能夠快速特異的擴增任何已知的 DNA 片段,因此被廣泛的應用于分子生物學的各個領(lǐng)域。Relia 熱啟動酶因具有 5’-3’核酸外切酶活性,可用于熒光定量 PCR 反應。采用熱啟動法擴增是提高 PCR 特異性的常用方法,熱啟動酶是很好的選擇。除此之外,因其具有的高特異性高靈敏度被廣泛應用到各個方面:構(gòu)建 cDNA 文庫,產(chǎn)生大量 DNA 測序,突變體分的析構(gòu)建,基因分離,遺傳病診斷,法醫(yī)鑒定等。

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熱啟動酶是耐高溫的依賴于DNA模板的DNA聚合酶,來源于嗜熱的嗜熱水生菌Thermus aquaticus YT一1,一般應用于PCR反應。TaqDNA聚合酶是一種M92+依賴酶,反應體系中須有Mg2+存在,然而保持適當?shù)腗g2+濃度十分重要,因為Mg2+濃度過高或過低均會影響引物與模板的結(jié)合、模板與PCR產(chǎn)物的解鏈溫度、引物二聚體的形成以及酶的活性與精 確性。

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布魯氏菌病:對種畜以外的牛羊進行布魯氏菌病免疫,種畜禁止免疫。各省份根據(jù)評估情況,原則上以縣為單位確定本省份的免疫區(qū)和非免疫區(qū)。免疫區(qū)內(nèi)不實施免疫的、非免疫區(qū)實施免疫的,養(yǎng)殖場(戶)應逐級報省級農(nóng)業(yè)農(nóng)村部門同意后實施。各省份根據(jù)評估結(jié)果,自行確定是否對奶畜免疫;確需免疫的,養(yǎng)殖場(戶)應逐級報省級農(nóng)業(yè)農(nóng)村部門同意后實施。免疫區(qū)域劃分和奶畜免疫等標準由省級農(nóng)業(yè)農(nóng)村部門確定。

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大部分分子診斷實驗室的核心技術(shù)都主要集中在檢測特異性、相對較短的DNA或RNA片段上。該技術(shù)能診斷傳染性疾病、鑒別影響藥物代謝的特殊基因變異型或檢測與疾病有關(guān)的基因,如與癌癥有關(guān)的基因。這些檢測的核心是實時定量聚合酶鏈反應(PCR)、轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)擴增(TMA)、靶向擴增和信號擴增等類似技術(shù)的應用。桑格排序和DNA片段分析或采用毛細電泳法的凝膠法都是分子診斷實驗室的關(guān)鍵技術(shù),但他們通常還包括檢測過程中的擴增步驟。為了能順利應用那些采用DNA和RNA來診斷疾病的檢測,分子診斷實驗室須要使用定義明確的工作流程,從而得到穩(wěn)定的、有效的結(jié)果,而當前已存在能幫助診斷實驗室實現(xiàn)每個工作流程流水化的特殊工具。

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在動物疫病診斷中,化驗室的操作較為關(guān)鍵,對診斷的結(jié)果有直接的影響。但是,在當前實驗室操作中還存在一-些問題,如檢測操作中、檢測報告中未填寫、不開具《檢測委托書》等這些問題的存在嚴重影響動物疫病的診斷,不利于動物疫病的防控。因此,在今后工作中,需要對相關(guān)工作制度進行不斷地完善,促使化驗室的操作更加規(guī)范化、科學化;加強對實驗室人員的專業(yè)培訓,提高其操作水平。只有這樣才能提高動物疫病檢測的準確性,為我國的動物疫病防控工作做好鋪墊。