蕪湖市熱啟動(dòng)Taq酶研發(fā)
發(fā)布時(shí)間:2023-06-04 01:28:27
蕪湖市熱啟動(dòng)Taq酶研發(fā)
分子診斷是當(dāng)代醫(yī)學(xué)發(fā)展的重要前沿領(lǐng)域之一,其核心技術(shù)是基因診斷,常規(guī)技術(shù)包括:(1)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR);(2)DNA測(cè)序(DNA sequencing);(3)熒光原位雜交技術(shù)(FISH);(4)DNA印跡技術(shù)( DNA blotting );(5)單核苷酸多態(tài)性(SNP);(6)連接酶鏈反應(yīng)(LCR);(7)基因芯片技術(shù)(gene chip)。

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全球,雖然只有少數(shù)的芯片可用于臨床診斷,但國(guó)內(nèi)基因芯片技術(shù)已經(jīng)處于世界領(lǐng) 跑的地位。基因芯片技術(shù)將是熒光定量PCR 檢測(cè)技術(shù)具挑戰(zhàn)的潛在對(duì)手,主要是:熒光定量PCR 技術(shù)一次只能檢測(cè)一個(gè)或幾個(gè)目標(biāo)基因,而基因芯片技術(shù)可以實(shí)現(xiàn)對(duì)大量目標(biāo)基因的同時(shí)檢測(cè)。隨著人類基因組計(jì)劃的進(jìn)展,基因芯片在國(guó)內(nèi)外已成為研發(fā)熱點(diǎn)。若基因芯片技術(shù)迅速成熟并大規(guī)模產(chǎn)業(yè)化,將對(duì)熒光定量PCR 檢測(cè)產(chǎn)生較大的沖擊。不過(guò),基因芯片的大規(guī)模臨床應(yīng)用還存在尚未克服的技術(shù)缺陷,主要是由于芯片診斷特異性和靈敏度低、芯片診斷成本高昂和芯片診斷配套儀器價(jià)格昂貴等原因,預(yù)計(jì)熒光定量PCR 檢測(cè)技術(shù)在今后5 到10 年內(nèi)可保持前鋒。

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PCR產(chǎn)品占據(jù)分子診斷的主要市場(chǎng),基因芯片是分子診斷市場(chǎng)發(fā)展的主要趨勢(shì)。PCR產(chǎn)品靈敏度高、特異性強(qiáng)、診斷窗口期短,可進(jìn)行定性、定量檢測(cè),可廣泛用于肝炎、性病、肺感染性疾病、優(yōu)生優(yōu)育、遺傳病基因、腫瘤等,填補(bǔ)了早期免疫檢測(cè)窗口期的檢測(cè)空白,為早期診斷、早期治療、安 全用血提供了有效的幫助?;蛐酒欠肿由飳W(xué)、微電子、計(jì)算機(jī)等多學(xué)科結(jié)合的結(jié)晶,綜合了多種現(xiàn)代高精尖技術(shù),被專家譽(yù)為診斷行業(yè)產(chǎn)品。但其成本高、開(kāi)發(fā)難度大,產(chǎn)品種類很少,只用于科研和藥物篩選等用途。

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常規(guī)普通PCR常見(jiàn)問(wèn)題:1. 優(yōu)化反應(yīng)條件,梯度摸索退火溫度,延長(zhǎng)退火延伸時(shí)間,增加反應(yīng)循環(huán)數(shù)(30-45區(qū)間為宜)。2. 對(duì)核酸模板進(jìn)行純化,或使用商業(yè)化核酸提取試劑盒進(jìn)行提取,增加核酸模板的上樣量。3. 優(yōu)化反應(yīng)體系(預(yù)混體系除外),改變檢測(cè)體系中的Mg2+濃度及dNTPs用量,更換體系中Buffer。4. 重新設(shè)計(jì)引物,避免引物二聚體和鏈內(nèi)二級(jí)結(jié)構(gòu),在一次稀釋引物后可分裝成多支小管,減少反復(fù)凍融次數(shù)。

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動(dòng)物疫病診斷的主要內(nèi)容有:一是對(duì)血、 尿、糞等進(jìn)行臨床常規(guī)化驗(yàn);二是從流行病學(xué)角度,調(diào)查研究動(dòng)物疫病流行情況,主要調(diào)查動(dòng)物發(fā)病時(shí)間及地點(diǎn)、疫病蔓延情況、疫情來(lái)源及傳播的途徑與方式等;三是從病理學(xué)方面,剖檢因忠傳染病而死亡的畜禽尸體,查看其病理變化,或者取病料進(jìn)行送檢,再進(jìn)一步做病理組織學(xué)方面的診斷;四是從微生物學(xué)角度,檢查、堅(jiān)定從患病的畜禽病料當(dāng)中分離并且培養(yǎng)出來(lái)的病原微生物,或者是進(jìn)行動(dòng)物接種試驗(yàn)等,五是從免疫學(xué)角度,對(duì)組織或者細(xì)胞的變態(tài)反應(yīng)、細(xì)胞的免疫功能及血清學(xué)反應(yīng)等進(jìn)行診斷。

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制定免疫計(jì)劃。各省份按照本意見(jiàn)要求,結(jié)合防控實(shí)際(含計(jì)劃單列市工作需求),制定本轄區(qū)的強(qiáng)制免疫計(jì)劃,報(bào)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部畜牧獸醫(yī)局備案,抄送中國(guó)動(dòng)物疫病預(yù)防控制心,并在省級(jí)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部門(mén)門(mén)戶網(wǎng)站公開(kāi)。對(duì)散養(yǎng)動(dòng)物,采取春秋兩季集中免疫與定期補(bǔ)免相結(jié)合的方式進(jìn)行,對(duì)規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)(戶)及有條件的地方實(shí)施程序化免疫。實(shí)行“先打后補(bǔ)”。各省份可采用養(yǎng)殖場(chǎng)(戶)自行免疫、第三方服務(wù)主體免疫、政府購(gòu)買服務(wù)等多種形式,推進(jìn)“先打后補(bǔ)”工作,在2022年年底前實(shí)現(xiàn)規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)(戶)全覆蓋,在2025年年底前逐步停止政府招標(biāo)采購(gòu)強(qiáng)制免疫疫苗。