廈門市實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀研發(fā)
發(fā)布時(shí)間:2023-06-22 01:27:46
廈門市實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀研發(fā)
Taq酶的酶動(dòng)力與擴(kuò)增效率有關(guān)。一般熱啟動(dòng)Taq酶的酶動(dòng)力越強(qiáng),PCR擴(kuò)增的指數(shù)增長期越長,‘S型’曲線更加典型,熒光信號(hào)值更高,而且更適合做多重PCR檢測(cè)。我們?cè)容^過多家公司的熱啟動(dòng)Taq酶,在國外品牌中,英國Bioline公司的熱啟動(dòng)Taq酶,酶動(dòng)力較好,可做4重PCR,等量起始模板CT30時(shí)的熒光信號(hào)值高。在國內(nèi)品牌中,BIOG熱啟動(dòng)Taq酶的指數(shù)期較長,可做3重PCR,且擴(kuò)增曲線的‘S’型不受影響,其它的國產(chǎn)品牌一般只能支持2重反應(yīng),在做3重反應(yīng)時(shí),擴(kuò)增曲線低矮,熒光信號(hào)值較低,無典型擴(kuò)增曲線,結(jié)果很難判定。

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分子診斷儀器主要包括核酸提取儀、PCR 擴(kuò)增儀、核酸分子雜交儀、基因芯片儀和基因測(cè)序儀等。在技術(shù)相對(duì)容易攻破的中端儀器領(lǐng)域,如核酸提取儀、PCR 擴(kuò)增儀、核酸分子雜交儀、基因芯片儀國產(chǎn)化已經(jīng)成型,國產(chǎn)產(chǎn)品占據(jù)了主要市場(chǎng),而 基因測(cè)序儀的國產(chǎn)化進(jìn)程正在發(fā)起突圍,主要表現(xiàn)為三種方式: (1)并購國外的測(cè)序儀公司,在其核心技術(shù)的基礎(chǔ)上推出自主品牌的測(cè)序儀,以華大基因?yàn)榇怼#?)利用內(nèi)生科研能力自主研發(fā),以華因康基因、紫鑫藥業(yè)等公司為代表。(3)與國外知名測(cè)序儀生產(chǎn)企業(yè)合作,在其測(cè)序儀原型的基礎(chǔ)上加以改造,形成具有特殊用途的自主品牌的測(cè)序儀,代表公司是貝瑞和康、達(dá)安基因和博奧生物等。

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熱啟動(dòng)通過抑 制一種基本成分延遲DNA合成,直到PCR 儀達(dá)到變性溫度。延緩加入Taq DNA 聚合酶的手工熱啟動(dòng)方法十分煩瑣,尤其是對(duì)高通量應(yīng)用。其他熱啟動(dòng)方法使用蠟防護(hù)層將一種基本成分(鎂離子、酶、模板、緩沖液等) 隔離開。在熱循環(huán)時(shí),蠟熔化把各種成分釋放出來并混在一起。蠟防護(hù)層法同樣比較煩瑣,易于污染,不適用于高通量應(yīng)用。

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高致病性禽流感:對(duì)全國所有雞、鴨、鵝、鵪鶉等人工飼養(yǎng)的禽類,根據(jù)當(dāng)?shù)貙?shí)際情況,在科學(xué)評(píng)估的基礎(chǔ)上選擇適宜疫苗,進(jìn)行H5亞型和(或)H7亞型高致病性禽流感免疫。對(duì)供研究和疫苗生產(chǎn)用的家禽、進(jìn)口國(地區(qū))明確要求不得實(shí)施高致病性禽流感免疫的出口家禽,以及因其他特殊原因不免疫的,有關(guān)養(yǎng)殖場(chǎng)(戶)逐級(jí)報(bào)省級(jí)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部門同意后,可不實(shí)施免疫。

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PCR產(chǎn)品占據(jù)分子診斷的主要市場(chǎng),基因芯片是分子診斷市場(chǎng)發(fā)展的主要趨勢(shì)。PCR產(chǎn)品靈敏度高、特異性強(qiáng)、診斷窗口期短,可進(jìn)行定性、定量檢測(cè),可廣泛用于肝炎、性病、肺感染性疾病、優(yōu)生優(yōu)育、遺傳病基因、腫瘤等,填補(bǔ)了早期免疫檢測(cè)窗口期的檢測(cè)空白,為早期診斷、早期治療、安 全用血提供了有效的幫助?;蛐酒欠肿由飳W(xué)、微電子、計(jì)算機(jī)等多學(xué)科結(jié)合的結(jié)晶,綜合了多種現(xiàn)代高精尖技術(shù),被專家譽(yù)為診斷行業(yè)產(chǎn)品。但其成本高、開發(fā)難度大,產(chǎn)品種類很少,只用于科研和藥物篩選等用途。

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隨著對(duì)動(dòng)物檢疫工作的發(fā)展與完善,僅依靠獸醫(yī)的經(jīng)驗(yàn)檢查已經(jīng)不能滿足現(xiàn)今動(dòng)物疫病診斷的需求,因此,病理化驗(yàn)室開始發(fā)揮重要作用.如藍(lán)耳病的病原學(xué)檢測(cè)方式需要采集病豬的扁桃體,淋巴結(jié),肺,肝,脾等,利用10%的中性福爾馬林進(jìn)行固定,經(jīng)過石蠟切片,HE染色之后使用光鏡對(duì)樣本進(jìn)行病理學(xué)組織檢查得出結(jié)論,又如豬瘟的病理學(xué)檢查方式主要有免疫熒光實(shí)驗(yàn),酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn),核酸探針技術(shù),基因芯片檢測(cè)技術(shù)等.