鐵嶺市實(shí)時熒光定量PCR儀研發(fā)
發(fā)布時間:2023-09-28 01:25:58
鐵嶺市實(shí)時熒光定量PCR儀研發(fā)
全球,雖然只有少數(shù)的芯片可用于臨床診斷,但國內(nèi)基因芯片技術(shù)已經(jīng)處于世界領(lǐng) 跑的地位。基因芯片技術(shù)將是熒光定量PCR 檢測技術(shù)具挑戰(zhàn)的潛在對手,主要是:熒光定量PCR 技術(shù)一次只能檢測一個或幾個目標(biāo)基因,而基因芯片技術(shù)可以實(shí)現(xiàn)對大量目標(biāo)基因的同時檢測。隨著人類基因組計劃的進(jìn)展,基因芯片在國內(nèi)外已成為研發(fā)熱點(diǎn)。若基因芯片技術(shù)迅速成熟并大規(guī)模產(chǎn)業(yè)化,將對熒光定量PCR 檢測產(chǎn)生較大的沖擊。不過,基因芯片的大規(guī)模臨床應(yīng)用還存在尚未克服的技術(shù)缺陷,主要是由于芯片診斷特異性和靈敏度低、芯片診斷成本高昂和芯片診斷配套儀器價格昂貴等原因,預(yù)計熒光定量PCR 檢測技術(shù)在今后5 到10 年內(nèi)可保持前鋒。

鐵嶺市實(shí)時熒光定量PCR儀研發(fā)
隨著對動物檢疫工作的發(fā)展與完善,僅依靠獸醫(yī)的經(jīng)驗(yàn)檢查已經(jīng)不能滿足現(xiàn)今動物疫病診斷的需求,因此,病理化驗(yàn)室開始發(fā)揮重要作用.如藍(lán)耳病的病原學(xué)檢測方式需要采集病豬的扁桃體,淋巴結(jié),肺,肝,脾等,利用10%的中性福爾馬林進(jìn)行固定,經(jīng)過石蠟切片,HE染色之后使用光鏡對樣本進(jìn)行病理學(xué)組織檢查得出結(jié)論,又如豬瘟的病理學(xué)檢查方式主要有免疫熒光實(shí)驗(yàn),酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn),核酸探針技術(shù),基因芯片檢測技術(shù)等.

鐵嶺市實(shí)時熒光定量PCR儀研發(fā)
動物疫病包括動物傳染病、寄生蟲病。動物傳染病,即由病原體侵入動物體內(nèi),使動物產(chǎn)生具有一定潛伏期和臨床癥狀并具有傳播性 的動物疫病,如口蹄疫、雞瘟、牛肺疫、炭疽、布魯氏菌病、狂 犬病等。動物寄生蟲病,即由寄生蟲寄生在動物體內(nèi)或體表引起 的疾病,如豬囊蟲病、旋毛蟲病、鉤端螺旋體病、血吸蟲病、疥瞞等。根據(jù)動物疫病對養(yǎng)殖業(yè)生產(chǎn)和人體健康的危害程度,我國還 將動物疫病分為下列三類:對人畜危害嚴(yán)重、需要采取緊急、嚴(yán) 厲的強(qiáng)制預(yù)防、控制、撲滅措施的為一類疫??;可造成重大經(jīng)濟(jì) 損失、需要采取嚴(yán)格控制、撲滅措施,防止疫情擴(kuò)散的為二類疫 ??;常見多發(fā)、可能造成重大經(jīng)濟(jì)損失、需要控制和凈化的為三 類疫病。

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動物防疫動物疫病的預(yù)防、控制、撲滅及動物和動物產(chǎn)品的檢疫。狹義的動物防疫,是為了預(yù)防某種動物疫病,對所飼養(yǎng)的動物進(jìn)行針對性地接種疫苗后,產(chǎn)生一種明顯針對該種疫病的免疫力,也就是通過打預(yù)防針而預(yù)防動物疫病的發(fā)生。疫病預(yù)防指采取一切手段將某種傳染病排除在一個未受感染動物群之外的防疫措施。通過多種隔離設(shè)施和檢疫措施阻止某種傳染病進(jìn)入一個尚未被污染的地區(qū);或通過免疫接種、藥物預(yù)防和環(huán)境控制等措施,保護(hù)動物免遭疫病危害。

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在PCR反應(yīng)早期,產(chǎn)生熒光的水平不能與背景明顯地區(qū)別,而后熒光的產(chǎn)生進(jìn)入指數(shù)期、線性期和終的平臺期,因此可以在PCR反應(yīng)處于指數(shù)期的某一點(diǎn) 上來檢測PCR產(chǎn)物的量,并且由此來推斷模板初的含量。為了便于對所檢測樣本進(jìn)行比較,在real-time Q-PCR反應(yīng)的指數(shù)期,首先需設(shè)定一定熒光信號的域值,一般這個域值(threshold)是以PCR反應(yīng)的前15個循環(huán)的熒光信號作為熒光本底信號 (baseline),熒光域值的缺省設(shè)置是3~15個循環(huán)的熒光信號的標(biāo)準(zhǔn)偏差的10倍。如果檢測到熒光信號超過域值被認(rèn)為是真 正的信號,它可用于定義 樣本的域值循環(huán)數(shù)(Ct)。Ct值的含義是:每個反應(yīng)管內(nèi)的熒光信號達(dá)到設(shè)定的域值時所經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)。研究表明,每個模板的Ct值與該模板的起始拷貝數(shù)的 對數(shù)存在線性關(guān)系,起始拷貝數(shù)越多,Ct值越小。利用已知起始拷貝數(shù)的標(biāo)準(zhǔn)品可作出標(biāo)準(zhǔn)曲線,因此只要獲得未知樣品的Ct值,即可從標(biāo)準(zhǔn)曲線上計算出該樣 品的起始拷貝數(shù)。