陽泉市實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀廠家
發(fā)布時(shí)間：2023-11-05 01:24:45
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全球，雖然只有少數(shù)的芯片可用于臨床診斷，但國內(nèi)基因芯片技術(shù)已經(jīng)處于世界領(lǐng) 跑的地位?；蛐酒夹g(shù)將是熒光定量PCR 檢測技術(shù)具挑戰(zhàn)的潛在對手，主要是：熒光定量PCR 技術(shù)一次只能檢測一個(gè)或幾個(gè)目標(biāo)基因，而基因芯片技術(shù)可以實(shí)現(xiàn)對大量目標(biāo)基因的同時(shí)檢測。隨著人類基因組計(jì)劃的進(jìn)展，基因芯片在國內(nèi)外已成為研發(fā)熱點(diǎn)。若基因芯片技術(shù)迅速成熟并大規(guī)模產(chǎn)業(yè)化，將對熒光定量PCR 檢測產(chǎn)生較大的沖擊。不過，基因芯片的大規(guī)模臨床應(yīng)用還存在尚未克服的技術(shù)缺陷，主要是由于芯片診斷特異性和靈敏度低、芯片診斷成本高昂和芯片診斷配套儀器價(jià)格昂貴等原因，預(yù)計(jì)熒光定量PCR 檢測技術(shù)在今后5 到10 年內(nèi)可保持前鋒。
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隨著對動物檢疫工作的發(fā)展與完善,僅依靠獸醫(yī)的經(jīng)驗(yàn)檢查已經(jīng)不能滿足現(xiàn)今動物疫病診斷的需求,因此,病理化驗(yàn)室開始發(fā)揮重要作用.如藍(lán)耳病的病原學(xué)檢測方式需要采集病豬的扁桃體,淋巴結(jié),肺,肝,脾等,利用10%的中性福爾馬林進(jìn)行固定,經(jīng)過石蠟切片,HE染色之后使用光鏡對樣本進(jìn)行病理學(xué)組織檢查得出結(jié)論,又如豬瘟的病理學(xué)檢查方式主要有免疫熒光實(shí)驗(yàn),酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn),核酸探針技術(shù),基因芯片檢測技術(shù)等.
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疫苗:是指用物理或化學(xué)方法將致病微生物殺死或致弱而制成的一種無致病性、有免疫原性的制劑，或者是直接提取致病微生物的免疫原性蛋白或編碼免疫蛋白的基因，利用分子生物學(xué)技術(shù)制成的具有免疫原性而無致病性的制劑。目前的疫苗有病毒(細(xì)菌)死苗、病毒(細(xì)菌)活苗、亞單位苗、基因工程苗等。血清型:是指微生物學(xué)中種以下的一種分 型。因?yàn)槲⑸镌诜N內(nèi)有不同的抗原性，因此可分不同的抗原型或血清型。
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Taq酶的酶動力與擴(kuò)增效率有關(guān)。一般熱啟動Taq酶的酶動力越強(qiáng)，PCR擴(kuò)增的指數(shù)增長期越長，‘S型’曲線更加典型，熒光信號值更高，而且更適合做多重PCR檢測。我們曾比較過多家公司的熱啟動Taq酶，在國外品牌中，英國Bioline公司的熱啟動Taq酶，酶動力較好，可做4重PCR，等量起始模板CT30時(shí)的熒光信號值高。在國內(nèi)品牌中，BIOG熱啟動Taq酶的指數(shù)期較長，可做3重PCR，且擴(kuò)增曲線的‘S’型不受影響，其它的國產(chǎn)品牌一般只能支持2重反應(yīng)，在做3重反應(yīng)時(shí)，擴(kuò)增曲線低矮，熒光信號值較低，無典型擴(kuò)增曲線，結(jié)果很難判定。
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分子診斷的主要技術(shù)有核酸分子雜交、聚合酶鏈反應(yīng)和生物芯片技術(shù)。1.核酸分子雜交技術(shù) 具有一定互補(bǔ)序列和核苷酸單鏈在液相或固相中按堿基互補(bǔ)配對原則締合成異質(zhì)雙鏈的過程，稱為核酸分子雜交。雜交的雙方是待測核酸序列和探針序列。應(yīng)用該技術(shù)可對特定DNA或RNA序列進(jìn)行定性或定量檢測。2.聚合酶鏈反應(yīng)（即Polymerase chain reaction，PCR）原理：PCR是模板DNA，引物和四種脫氧核糖核昔三磷酸（dNTP）在DNA聚合酶作用下發(fā)生酶促聚合反應(yīng)，擴(kuò)增出所需目的DNA。包括三個(gè)基本步驟：雙鏈DNA模板加熱變性成單鏈（變性）；在低溫下引物與單鏈DNA互補(bǔ)配對（退火）；在適宜溫度下TapDNA聚合酶催化引物沿著模板DNA延伸。3.生物芯片技術(shù)是近年發(fā)展起來的分子生物學(xué)與微電子技術(shù)相結(jié)合的核酸分析檢測技術(shù)。起初的生物芯片技術(shù)主要目標(biāo)是用于DNA序列測定、基因表達(dá)譜鑒定和基因突變體檢測和分析，所以又稱為DNA芯片或基因芯片技術(shù)。由于這一技術(shù)已擴(kuò)展至免疫反應(yīng)、受體結(jié)合等非核酸領(lǐng)域，出現(xiàn)了蛋白質(zhì)芯片、免疫芯片、細(xì)胞芯片、組織芯片等，所以改稱生物芯片技術(shù)更符合發(fā)展趨勢。