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嘉興市熱啟動Taq酶研發(fā)

發(fā)布時間:2024-04-01 01:15:17
嘉興市熱啟動Taq酶研發(fā)

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全球,雖然只有少數(shù)的芯片可用于臨床診斷,但國內(nèi)基因芯片技術(shù)已經(jīng)處于世界領(lǐng) 跑的地位。基因芯片技術(shù)將是熒光定量PCR 檢測技術(shù)具挑戰(zhàn)的潛在對手,主要是:熒光定量PCR 技術(shù)一次只能檢測一個或幾個目標(biāo)基因,而基因芯片技術(shù)可以實現(xiàn)對大量目標(biāo)基因的同時檢測。隨著人類基因組計劃的進展,基因芯片在國內(nèi)外已成為研發(fā)熱點。若基因芯片技術(shù)迅速成熟并大規(guī)模產(chǎn)業(yè)化,將對熒光定量PCR 檢測產(chǎn)生較大的沖擊。不過,基因芯片的大規(guī)模臨床應(yīng)用還存在尚未克服的技術(shù)缺陷,主要是由于芯片診斷特異性和靈敏度低、芯片診斷成本高昂和芯片診斷配套儀器價格昂貴等原因,預(yù)計熒光定量PCR 檢測技術(shù)在今后5 到10 年內(nèi)可保持前鋒。

嘉興市熱啟動Taq酶研發(fā)

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分子診斷是當(dāng)代醫(yī)學(xué)發(fā)展的重要前沿領(lǐng)域之一,其核心技術(shù)是基因診斷,常規(guī)技術(shù)包括:(1)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR);(2)DNA測序(DNA sequencing);(3)熒光原位雜交技術(shù)(FISH);(4)DNA印跡技術(shù)( DNA blotting );(5)單核苷酸多態(tài)性(SNP);(6)連接酶鏈反應(yīng)(LCR);(7)基因芯片技術(shù)(gene chip)。

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在動物疫病診斷中,化驗室的操作較為關(guān)鍵,對診斷的結(jié)果有直接的影響。但是,在當(dāng)前實驗室操作中還存在一-些問題,如檢測操作中、檢測報告中未填寫、不開具《檢測委托書》等這些問題的存在嚴(yán)重影響動物疫病的診斷,不利于動物疫病的防控。因此,在今后工作中,需要對相關(guān)工作制度進行不斷地完善,促使化驗室的操作更加規(guī)范化、科學(xué)化;加強對實驗室人員的專業(yè)培訓(xùn),提高其操作水平。只有這樣才能提高動物疫病檢測的準(zhǔn)確性,為我國的動物疫病防控工作做好鋪墊。

嘉興市熱啟動Taq酶研發(fā)

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熱啟動Taq酶的產(chǎn)生:在PCR的反應(yīng)過程中,主要有三個階段:變性、復(fù)性、延伸。Taq DNA聚合酶的復(fù)性溫度是72℃,但其在低溫下也有活性(活性較弱),也能催化引物與模板復(fù)性,只是錯配率高,發(fā)生非特異性復(fù)性機率大。這樣在未達到72℃之前,反應(yīng)在Taq酶聚合下不斷擴增出非特異性產(chǎn)物,而使實驗失敗。在傳統(tǒng)的PCR反應(yīng)中,這樣由低溫上升至高溫的過程中,引物錯配和二聚體的形成機率非常高,Hot Start Taq DNA聚合酶就是讓PCR反應(yīng)一開始就在大于70℃下進行。當(dāng)溫度較低時,酶活性被封閉,當(dāng)溫度大于一定溫度時酶又開始工作。這樣就避免了在低溫下復(fù)性、延伸的過程,消除引物錯配和二聚體形成,減少非特異性產(chǎn)物的產(chǎn)生。我們是如何對Hotstart Taq酶修飾而讓它只在高溫下才能發(fā)揮活性?這就是Hot Start taq酶的作用原理。