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包頭市熱啟動Taq酶價格

發(fā)布時間:2024-04-18 01:14:16
包頭市熱啟動Taq酶價格

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Taq酶的酶動力與擴(kuò)增效率有關(guān)。一般熱啟動Taq酶的酶動力越強,PCR擴(kuò)增的指數(shù)增長期越長,‘S型’曲線更加典型,熒光信號值更高,而且更適合做多重PCR檢測。我們曾比較過多家公司的熱啟動Taq酶,在國外品牌中,英國Bioline公司的熱啟動Taq酶,酶動力較好,可做4重PCR,等量起始模板CT30時的熒光信號值高。在國內(nèi)品牌中,BIOG熱啟動Taq酶的指數(shù)期較長,可做3重PCR,且擴(kuò)增曲線的‘S’型不受影響,其它的國產(chǎn)品牌一般只能支持2重反應(yīng),在做3重反應(yīng)時,擴(kuò)增曲線低矮,熒光信號值較低,無典型擴(kuò)增曲線,結(jié)果很難判定。

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熱啟動Taq酶的產(chǎn)生:在PCR的反應(yīng)過程中,主要有三個階段:變性、復(fù)性、延伸。Taq DNA聚合酶的復(fù)性溫度是72℃,但其在低溫下也有活性(活性較弱),也能催化引物與模板復(fù)性,只是錯配率高,發(fā)生非特異性復(fù)性機率大。這樣在未達(dá)到72℃之前,反應(yīng)在Taq酶聚合下不斷擴(kuò)增出非特異性產(chǎn)物,而使實驗失敗。在傳統(tǒng)的PCR反應(yīng)中,這樣由低溫上升至高溫的過程中,引物錯配和二聚體的形成機率非常高,Hot Start Taq DNA聚合酶就是讓PCR反應(yīng)一開始就在大于70℃下進(jìn)行。當(dāng)溫度較低時,酶活性被封閉,當(dāng)溫度大于一定溫度時酶又開始工作。這樣就避免了在低溫下復(fù)性、延伸的過程,消除引物錯配和二聚體形成,減少非特異性產(chǎn)物的產(chǎn)生。我們是如何對Hotstart Taq酶修飾而讓它只在高溫下才能發(fā)揮活性?這就是Hot Start taq酶的作用原理。

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大部分分子診斷實驗室的核心技術(shù)都主要集中在檢測特異性、相對較短的DNA或RNA片段上。該技術(shù)能診斷傳染性疾病、鑒別影響藥物代謝的特殊基因變異型或檢測與疾病有關(guān)的基因,如與癌癥有關(guān)的基因。這些檢測的核心是實時定量聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)、轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)擴(kuò)增(TMA)、靶向擴(kuò)增和信號擴(kuò)增等類似技術(shù)的應(yīng)用。桑格排序和DNA片段分析或采用毛細(xì)電泳法的凝膠法都是分子診斷實驗室的關(guān)鍵技術(shù),但他們通常還包括檢測過程中的擴(kuò)增步驟。為了能順利應(yīng)用那些采用DNA和RNA來診斷疾病的檢測,分子診斷實驗室須要使用定義明確的工作流程,從而得到穩(wěn)定的、有效的結(jié)果,而當(dāng)前已存在能幫助診斷實驗室實現(xiàn)每個工作流程流水化的特殊工具。

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PCR產(chǎn)品占據(jù)分子診斷的主要市場,基因芯片是分子診斷市場發(fā)展的主要趨勢。PCR產(chǎn)品靈敏度高、特異性強、診斷窗口期短,可進(jìn)行定性、定量檢測,可廣泛用于肝炎、性病、肺感染性疾病、優(yōu)生優(yōu)育、遺傳病基因、腫瘤等,填補了早期免疫檢測窗口期的檢測空白,為早期診斷、早期治療、安 全用血提供了有效的幫助?;蛐酒欠肿由飳W(xué)、微電子、計算機等多學(xué)科結(jié)合的結(jié)晶,綜合了多種現(xiàn)代高精尖技術(shù),被專家譽為診斷行業(yè)產(chǎn)品。但其成本高、開發(fā)難度大,產(chǎn)品種類很少,只用于科研和藥物篩選等用途。