錦州市熱啟動(dòng)Taq酶應(yīng)用領(lǐng)域
發(fā)布時(shí)間：2024-06-07 01:14:23
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動(dòng)物檢疫的分類:根據(jù)我國現(xiàn)行的動(dòng)物檢疫法律規(guī)定，我國動(dòng)物檢疫分為進(jìn)出境檢疫和國內(nèi).檢疫兩大類。①進(jìn)出境動(dòng)物檢疫。是指對進(jìn)出我國國境的動(dòng)物、動(dòng)物產(chǎn)品，由口岸動(dòng)植物檢疫機(jī)關(guān)實(shí)施的檢疫。具體分為:進(jìn)境動(dòng)物、動(dòng)物產(chǎn)品檢疫;出境動(dòng)物、動(dòng)物產(chǎn)品檢疫;過境動(dòng)物、動(dòng)物產(chǎn)品檢疫;②國內(nèi)檢疫。指對國內(nèi)流動(dòng)的動(dòng)物、動(dòng)物產(chǎn)品所進(jìn)行的檢疫。具體劃分為:產(chǎn)地檢疫、屠宰檢疫、動(dòng)物產(chǎn)品檢疫。
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加強(qiáng)組織領(lǐng)導(dǎo)。地方各級(jí)人民政府對轄區(qū)內(nèi)動(dòng)物防疫工作負(fù)總責(zé)，組織有關(guān)部門按照職責(zé)分工，落實(shí)強(qiáng)制免疫工作任務(wù)。省級(jí)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部門具體組織實(shí)施強(qiáng)制免疫，各級(jí)動(dòng)物疫病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)負(fù)責(zé)開展養(yǎng)殖環(huán)節(jié)強(qiáng)制免疫效果評價(jià)，各級(jí)承擔(dān)動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督職責(zé)的機(jī)構(gòu)負(fù)責(zé)監(jiān)督檢查養(yǎng)殖場（戶）履行強(qiáng)制免疫義務(wù)情況。落實(shí)主體責(zé)任。《中華人民共和國動(dòng)物防疫法》規(guī)定，飼養(yǎng)動(dòng)物的單位和個(gè)人是免疫主體，承擔(dān)免疫責(zé)任。有關(guān)單位和個(gè)人應(yīng)自行開展免疫或向第三方服務(wù)主體購買免疫服務(wù)，對飼養(yǎng)動(dòng)物實(shí)施免疫接種，并按有關(guān)規(guī)定建立免疫檔案、加施畜禽標(biāo)識(shí)，確?？勺匪?。
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高致病性禽流感：對全國所有雞、鴨、鵝、鵪鶉等人工飼養(yǎng)的禽類，根據(jù)當(dāng)?shù)貙?shí)際情況，在科學(xué)評估的基礎(chǔ)上選擇適宜疫苗，進(jìn)行H5亞型和（或）H7亞型高致病性禽流感免疫。對供研究和疫苗生產(chǎn)用的家禽、進(jìn)口國（地區(qū)）明確要求不得實(shí)施高致病性禽流感免疫的出口家禽，以及因其他特殊原因不免疫的，有關(guān)養(yǎng)殖場（戶）逐級(jí)報(bào)省級(jí)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部門同意后，可不實(shí)施免疫。
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熱啟動(dòng)通過抑 制一種基本成分延遲DNA合成，直到PCR 儀達(dá)到變性溫度。延緩加入Taq DNA 聚合酶的手工熱啟動(dòng)方法十分煩瑣，尤其是對高通量應(yīng)用。其他熱啟動(dòng)方法使用蠟防護(hù)層將一種基本成分(鎂離子、酶、模板、緩沖液等) 隔離開。在熱循環(huán)時(shí)，蠟熔化把各種成分釋放出來并混在一起。蠟防護(hù)層法同樣比較煩瑣，易于污染，不適用于高通量應(yīng)用。
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熱啟動(dòng)Taq酶的產(chǎn)生：在PCR的反應(yīng)過程中，主要有三個(gè)階段：變性、復(fù)性、延伸。Taq DNA聚合酶的復(fù)性溫度是72℃，但其在低溫下也有活性（活性較弱），也能催化引物與模板復(fù)性，只是錯(cuò)配率高，發(fā)生非特異性復(fù)性機(jī)率大。這樣在未達(dá)到72℃之前，反應(yīng)在Taq酶聚合下不斷擴(kuò)增出非特異性產(chǎn)物，而使實(shí)驗(yàn)失敗。在傳統(tǒng)的PCR反應(yīng)中，這樣由低溫上升至高溫的過程中，引物錯(cuò)配和二聚體的形成機(jī)率非常高，Hot Start Taq DNA聚合酶就是讓PCR反應(yīng)一開始就在大于70℃下進(jìn)行。當(dāng)溫度較低時(shí)，酶活性被封閉，當(dāng)溫度大于一定溫度時(shí)酶又開始工作。這樣就避免了在低溫下復(fù)性、延伸的過程，消除引物錯(cuò)配和二聚體形成，減少非特異性產(chǎn)物的產(chǎn)生。我們是如何對Hotstart Taq酶修飾而讓它只在高溫下才能發(fā)揮活性？這就是Hot Start taq酶的作用原理。
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加強(qiáng)技術(shù)指導(dǎo)。中國動(dòng)物疫病預(yù)防控制中 心要制定國家動(dòng)物疫病強(qiáng)制免疫技術(shù)指南，組織開展省級(jí)免疫技術(shù)師資培訓(xùn)。國家獸醫(yī)參考實(shí)驗(yàn)室、專業(yè)實(shí)驗(yàn)室、區(qū)域?qū)嶒?yàn)室和各省份動(dòng)物疫病預(yù)防控制中 心要持續(xù)跟蹤病原變化和流行趨勢，為各地免疫方案的制定、疫苗的選擇和更新提供技術(shù)支撐。各省份要組織做好鄉(xiāng)鎮(zhèn)動(dòng)物防疫機(jī)構(gòu)、村級(jí)防疫員及社會(huì)化服務(wù)組織的免疫技術(shù)培訓(xùn)。疫苗及診斷試劑供應(yīng)企業(yè)要做好培訓(xùn)、技術(shù)服務(wù)等工作。