朝陽市實時熒光定量PCR儀優(yōu)勢
發(fā)布時間:2024-11-04 01:06:20
朝陽市實時熒光定量PCR儀優(yōu)勢
熱啟動Taq酶產(chǎn)品優(yōu)勢;1. 靈敏度高:可直接擴增1個拷貝的支原體DNA。2. 化學(xué)修飾,無動物性DNA污染。3. 性價比高:相對市面上zui常用的熱啟動聚合酶性價比更高。4. 擴增效率高:熒光定量PCR起峰快,Ct值低,擴增效率高。5. 可重復(fù)性高:熒光定量PCR擴增曲線重合度高,受干擾影響少。熱啟動Taq酶應(yīng)用:1. 熱啟動PCR 2. 熒光定量PCR 3. DNA序列測定4. TA cloning.

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強化監(jiān)督檢查。中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所要加強疫苗質(zhì)量監(jiān)管工作,開展監(jiān)督抽檢,對生產(chǎn)企業(yè)實行督導(dǎo)檢查。各級農(nóng)業(yè)農(nóng)村部門要加強對轄區(qū)內(nèi)強制免疫疫苗生產(chǎn)企業(yè)的監(jiān)督檢查,督促生產(chǎn)企業(yè)嚴(yán)格執(zhí)行獸藥生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范(GMP)。實施獸藥“二維碼”管理制度,加強疫苗追蹤和全程質(zhì)量監(jiān)管,嚴(yán)厲打擊制售假劣疫苗行為。對拒不履行強制免疫義務(wù)、因免疫不到位引發(fā)動物疫情的單位和個人,要依法處理并追究責(zé)任。

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世界各國高度重視分子診斷技術(shù)的發(fā)展,基因芯片將成為新一代分子診斷試劑開發(fā)的主流。基因芯片是分子生物學(xué)、微電子、計算機等多學(xué)科結(jié)合的結(jié)晶,綜合了多種現(xiàn)代高精尖技術(shù),被專家譽為“診斷行業(yè)產(chǎn)品”?;蛐酒哂型瑫r能夠檢測多個靶點的功能,具有快速有效的特點。因而基因芯片成為新一代分子診斷試劑的主要開發(fā)方向,但其成本高、開發(fā)難度大,產(chǎn)品種類很少,只用于科研和藥物篩選等用途?;蛐酒拇笠?guī)模臨床應(yīng)用還存在尚未克服的技術(shù)缺陷,主要是由于芯片診斷特異性和靈敏度低、芯片診斷成本高昂和芯片診斷配套儀器價格昂貴等原因。

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分子診斷是當(dāng)代醫(yī)學(xué)發(fā)展的重要前沿領(lǐng)域之一,其核心技術(shù)是基因診斷,常規(guī)技術(shù)包括:(1)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR);(2)DNA測序(DNA sequencing);(3)熒光原位雜交技術(shù)(FISH);(4)DNA印跡技術(shù)( DNA blotting );(5)單核苷酸多態(tài)性(SNP);(6)連接酶鏈反應(yīng)(LCR);(7)基因芯片技術(shù)(gene chip)。

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Taq酶的酶動力與擴增效率有關(guān)。一般熱啟動Taq酶的酶動力越強,PCR擴增的指數(shù)增長期越長,‘S型’曲線更加典型,熒光信號值更高,而且更適合做多重PCR檢測。我們曾比較過多家公司的熱啟動Taq酶,在國外品牌中,英國Bioline公司的熱啟動Taq酶,酶動力較好,可做4重PCR,等量起始模板CT30時的熒光信號值高。在國內(nèi)品牌中,BIOG熱啟動Taq酶的指數(shù)期較長,可做3重PCR,且擴增曲線的‘S’型不受影響,其它的國產(chǎn)品牌一般只能支持2重反應(yīng),在做3重反應(yīng)時,擴增曲線低矮,熒光信號值較低,無典型擴增曲線,結(jié)果很難判定。

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熱啟動PCR(hot start PCR)是指使Taq DNA 聚合酶只有在樣品溫度至少超過70℃時才發(fā)揮作用的PCR,可提高反應(yīng)的特異性。Taq DNA 聚合酶通常在比適宜溫度低得多的條件下仍有較強的活性。PCR 反應(yīng)的初加熱過程中,樣品溫度上升到70℃之前,在較低的溫度下引物可能與部分單鏈模板形成非特異性結(jié)合,并在Taq DNA 聚合酶的作用下延伸。結(jié)果會導(dǎo)致非靶序列的擴增,影響反應(yīng)的特異性。熱啟動可減少非靶序列的擴增,提高反應(yīng)的特異性。在引物設(shè)計時如果某位點因為遺傳元件的定位而受限,如site-directed 突變、表達(dá)克隆或用于DNA 工程的遺傳元件的構(gòu)建和操作等情況,熱啟動PCR 尤為有效。