邯鄲市分子診斷試劑原材料廠家
發(fā)布時(shí)間：2025-01-26 01:00:27
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Taq酶的酶動(dòng)力與擴(kuò)增效率有關(guān)。一般熱啟動(dòng)Taq酶的酶動(dòng)力越強(qiáng)，PCR擴(kuò)增的指數(shù)增長期越長，‘S型’曲線更加典型，熒光信號值更高，而且更適合做多重PCR檢測。我們曾比較過多家公司的熱啟動(dòng)Taq酶，在國外品牌中，英國Bioline公司的熱啟動(dòng)Taq酶，酶動(dòng)力較好，可做4重PCR，等量起始模板CT30時(shí)的熒光信號值高。在國內(nèi)品牌中，BIOG熱啟動(dòng)Taq酶的指數(shù)期較長，可做3重PCR，且擴(kuò)增曲線的‘S’型不受影響，其它的國產(chǎn)品牌一般只能支持2重反應(yīng)，在做3重反應(yīng)時(shí)，擴(kuò)增曲線低矮，熒光信號值較低，無典型擴(kuò)增曲線，結(jié)果很難判定。
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加強(qiáng)組織領(lǐng)導(dǎo)。地方各級人民政府對轄區(qū)內(nèi)動(dòng)物防疫工作負(fù)總責(zé)，組織有關(guān)部門按照職責(zé)分工，落實(shí)強(qiáng)制免疫工作任務(wù)。省級農(nóng)業(yè)農(nóng)村部門具體組織實(shí)施強(qiáng)制免疫，各級動(dòng)物疫病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)負(fù)責(zé)開展養(yǎng)殖環(huán)節(jié)強(qiáng)制免疫效果評價(jià)，各級承擔(dān)動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督職責(zé)的機(jī)構(gòu)負(fù)責(zé)監(jiān)督檢查養(yǎng)殖場（戶）履行強(qiáng)制免疫義務(wù)情況。落實(shí)主體責(zé)任?！吨腥A人民共和國動(dòng)物防疫法》規(guī)定，飼養(yǎng)動(dòng)物的單位和個(gè)人是免疫主體，承擔(dān)免疫責(zé)任。有關(guān)單位和個(gè)人應(yīng)自行開展免疫或向第三方服務(wù)主體購買免疫服務(wù)，對飼養(yǎng)動(dòng)物實(shí)施免疫接種，并按有關(guān)規(guī)定建立免疫檔案、加施畜禽標(biāo)識，確?？勺匪?。
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熱啟動(dòng)酶是耐高溫的依賴于DNA模板的DNA聚合酶，來源于嗜熱的嗜熱水生菌Thermus aquaticus YT一1，一般應(yīng)用于PCR反應(yīng)。TaqDNA聚合酶是一種M92+依賴酶，反應(yīng)體系中須有Mg2+存在，然而保持適當(dāng)?shù)腗g2+濃度十分重要，因?yàn)镸g2+濃度過高或過低均會(huì)影響引物與模板的結(jié)合、模板與PCR產(chǎn)物的解鏈溫度、引物二聚體的形成以及酶的活性與精 確性。
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選擇靈敏度高的熱啟動(dòng)Taq酶。一般說，Taq酶的擴(kuò)增效率高，靈敏度就高，但也有不一致的情況。如果要擴(kuò)增的樣本目標(biāo)基因豐度較低，建議對Taq酶的擴(kuò)增靈敏度進(jìn)行檢測。常見的檢測方法是將目標(biāo)基因質(zhì)粒片段進(jìn)行10倍或5倍梯度稀釋，在較低的幾個(gè)稀釋度進(jìn)行PCR檢測，選擇檢測靈敏度較高的熱啟動(dòng)Taq酶。目前國內(nèi)市場上常用的ABI、Bioline、Biog的擴(kuò)增靈敏度都比較高，但知名品牌T的靈敏度略低，研究者可根據(jù)自身的實(shí)驗(yàn)要求進(jìn)行選擇。