福州市實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀標(biāo)準(zhǔn)
發(fā)布時(shí)間：2022-07-05 01:37:55
福州市實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀標(biāo)準(zhǔn)
做好免疫記錄。養(yǎng)殖場（戶）要詳細(xì)記錄畜禽存欄、出欄、免疫等情況，特別是疫苗種類、生產(chǎn)廠家、生產(chǎn)批號等信息。鄉(xiāng)鎮(zhèn)動(dòng)物防疫機(jī)構(gòu)、村級防疫員要做好免疫記錄、按時(shí)報(bào)告，確保免疫記錄與畜禽標(biāo)識(shí)相符。落實(shí)報(bào)告制度。各省份按月報(bào)告疫苗采購及免疫情況。在每年3—5月、9—11月春秋兩季集中免疫期間，對免疫進(jìn)展實(shí)行周報(bào)告制度。各省份要明確專人負(fù)責(zé)匯總、統(tǒng)計(jì)免疫信息，按時(shí)報(bào)中國動(dòng)物疫病預(yù)防控制中 心。
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傳染病流行過程的三:個(gè)基本環(huán)節(jié):①傳染源。即傳染來源，就是被感染的動(dòng)物，包括傳染病病畜禽和帶菌(毒)動(dòng)物，如潛伏期帶菌(毒)、病愈后帶菌(毒)及健康動(dòng)物帶菌(毒)等。②傳播方式和途徑。有直接接觸傳播及間接接觸傳播。③易感動(dòng)物。就是對某種傳染病的病原體有易感性的動(dòng)物。
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分子診斷的主要技術(shù)有核酸分子雜交、聚合酶鏈反應(yīng)和生物芯片技術(shù)。1.核酸分子雜交技術(shù) 具有一定互補(bǔ)序列和核苷酸單鏈在液相或固相中按堿基互補(bǔ)配對原則締合成異質(zhì)雙鏈的過程，稱為核酸分子雜交。雜交的雙方是待測核酸序列和探針序列。應(yīng)用該技術(shù)可對特定DNA或RNA序列進(jìn)行定性或定量檢測。2.聚合酶鏈反應(yīng)（即Polymerase chain reaction，PCR）原理：PCR是模板DNA，引物和四種脫氧核糖核昔三磷酸（dNTP）在DNA聚合酶作用下發(fā)生酶促聚合反應(yīng)，擴(kuò)增出所需目的DNA。包括三個(gè)基本步驟：雙鏈DNA模板加熱變性成單鏈（變性）；在低溫下引物與單鏈DNA互補(bǔ)配對（退火）；在適宜溫度下TapDNA聚合酶催化引物沿著模板DNA延伸。3.生物芯片技術(shù)是近年發(fā)展起來的分子生物學(xué)與微電子技術(shù)相結(jié)合的核酸分析檢測技術(shù)。起初的生物芯片技術(shù)主要目標(biāo)是用于DNA序列測定、基因表達(dá)譜鑒定和基因突變體檢測和分析，所以又稱為DNA芯片或基因芯片技術(shù)。由于這一技術(shù)已擴(kuò)展至免疫反應(yīng)、受體結(jié)合等非核酸領(lǐng)域，出現(xiàn)了蛋白質(zhì)芯片、免疫芯片、細(xì)胞芯片、組織芯片等，所以改稱生物芯片技術(shù)更符合發(fā)展趨勢。
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熱啟動(dòng)PCR（hot start PCR）是指使Taq DNA 聚合酶只有在樣品溫度至少超過70℃時(shí)才發(fā)揮作用的PCR，可提高反應(yīng)的特異性。Taq DNA 聚合酶通常在比適宜溫度低得多的條件下仍有較強(qiáng)的活性。PCR 反應(yīng)的初加熱過程中，樣品溫度上升到70℃之前，在較低的溫度下引物可能與部分單鏈模板形成非特異性結(jié)合，并在Taq DNA 聚合酶的作用下延伸。結(jié)果會(huì)導(dǎo)致非靶序列的擴(kuò)增，影響反應(yīng)的特異性。熱啟動(dòng)可減少非靶序列的擴(kuò)增，提高反應(yīng)的特異性。在引物設(shè)計(jì)時(shí)如果某位點(diǎn)因?yàn)檫z傳元件的定位而受限，如site-directed 突變、表達(dá)克隆或用于DNA 工程的遺傳元件的構(gòu)建和操作等情況，熱啟動(dòng)PCR 尤為有效。