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遼陽(yáng)市分子診斷試劑原材料研發(fā)

熱啟動(dòng)Taq酶產(chǎn)品優(yōu)勢(shì);1. 靈敏度高：可直接擴(kuò)增1個(gè)拷貝的支原體DNA。2. 化學(xué)修飾，無(wú)動(dòng)物性DNA污染。3. 性?xún)r(jià)比高：相對(duì)市面上zui常用的熱啟動(dòng)聚合酶性?xún)r(jià)比更高。4. 擴(kuò)增效率高：熒光定量PCR起峰快，Ct值低，擴(kuò)增效率高。5. 可重復(fù)性高：熒光定量PCR擴(kuò)增曲線重合度高，受干擾影響少。熱啟動(dòng)Taq酶應(yīng)用：1. 熱啟動(dòng)PCR 2. 熒光定量PCR 3. DNA序列測(cè)定4. TA cloning.

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分子診斷儀器主要包括核酸提取儀、PCR 擴(kuò)增儀、核酸分子雜交儀、基因芯片儀和基因測(cè)序儀等。在技術(shù)相對(duì)容易攻破的中端儀器領(lǐng)域，如核酸提取儀、PCR 擴(kuò)增儀、核酸分子雜交儀、基因芯片儀國(guó)產(chǎn)化已經(jīng)成型，國(guó)產(chǎn)產(chǎn)品占據(jù)了主要市場(chǎng)，而 基因測(cè)序儀的國(guó)產(chǎn)化進(jìn)程正在發(fā)起突圍，主要表現(xiàn)為三種方式： （1）并購(gòu)國(guó)外的測(cè)序儀公司，在其核心技術(shù)的基礎(chǔ)上推出自主品牌的測(cè)序儀，以華大基因?yàn)榇?。?）利用內(nèi)生科研能力自主研發(fā)，以華因康基因、紫鑫藥業(yè)等公司為代表。（3）與國(guó)外知名測(cè)序儀生產(chǎn)企業(yè)合作，在其測(cè)序儀原型的基礎(chǔ)上加以改造，形成具有特殊用途的自主品牌的測(cè)序儀，代表公司是貝瑞和康、達(dá)安基因和博奧生物等。

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熱啟動(dòng)通過(guò)抑 制一種基本成分延遲DNA合成，直到PCR 儀達(dá)到變性溫度。延緩加入Taq DNA 聚合酶的手工熱啟動(dòng)方法十分煩瑣，尤其是對(duì)高通量應(yīng)用。其他熱啟動(dòng)方法使用蠟防護(hù)層將一種基本成分(鎂離子、酶、模板、緩沖液等) 隔離開(kāi)。在熱循環(huán)時(shí)，蠟熔化把各種成分釋放出來(lái)并混在一起。蠟防護(hù)層法同樣比較煩瑣，易于污染，不適用于高通量應(yīng)用。

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全球，雖然只有少數(shù)的芯片可用于臨床診斷，但國(guó)內(nèi)基因芯片技術(shù)已經(jīng)處于世界領(lǐng) 跑的地位。基因芯片技術(shù)將是熒光定量PCR 檢測(cè)技術(shù)具挑戰(zhàn)的潛在對(duì)手，主要是：熒光定量PCR 技術(shù)一次只能檢測(cè)一個(gè)或幾個(gè)目標(biāo)基因，而基因芯片技術(shù)可以實(shí)現(xiàn)對(duì)大量目標(biāo)基因的同時(shí)檢測(cè)。隨著人類(lèi)基因組計(jì)劃的進(jìn)展，基因芯片在國(guó)內(nèi)外已成為研發(fā)熱點(diǎn)。若基因芯片技術(shù)迅速成熟并大規(guī)模產(chǎn)業(yè)化，將對(duì)熒光定量PCR 檢測(cè)產(chǎn)生較大的沖擊。不過(guò)，基因芯片的大規(guī)模臨床應(yīng)用還存在尚未克服的技術(shù)缺陷，主要是由于芯片診斷特異性和靈敏度低、芯片診斷成本高昂和芯片診斷配套儀器價(jià)格昂貴等原因，預(yù)計(jì)熒光定量PCR 檢測(cè)技術(shù)在今后5 到10 年內(nèi)可保持前鋒。

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實(shí)時(shí)熒光定量pcr儀，由熒光定量系統(tǒng)和計(jì)算機(jī)組成，用來(lái)監(jiān)測(cè)循環(huán)過(guò)程的熒光。與實(shí)時(shí)設(shè)備相連的計(jì)算機(jī)收集熒光數(shù)據(jù)。數(shù)據(jù)通過(guò)開(kāi)發(fā)的實(shí)時(shí)分析軟件以圖表的形式顯示。原始數(shù)據(jù)被繪制成熒光強(qiáng)度相對(duì)于循環(huán)數(shù)的圖表。原始數(shù)據(jù)收集后可以開(kāi)始分析。實(shí)時(shí)設(shè)備的軟件能使收集到的數(shù)據(jù)進(jìn)行正常化處理來(lái)彌補(bǔ)背景熒光的差異。正?；罂梢栽O(shè)定域值水平，這就是分析熒光數(shù)據(jù)的水平。

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化驗(yàn)室診斷方法采用的檢測(cè)依據(jù)有以下幾種:①?lài)?guó)家標(biāo)準(zhǔn)以及農(nóng)業(yè)標(biāo)準(zhǔn);②動(dòng)物疫病檢測(cè)的其他規(guī)范:③化驗(yàn)室自行設(shè)定的檢測(cè)方法。不管采用何種方法，都需要考慮化驗(yàn)室自身的條件及樣品類(lèi)型，如在對(duì)偽狂犬病進(jìn)行診斷時(shí)，實(shí)驗(yàn)室有酶標(biāo)儀，沒(méi)有基因擴(kuò)增儀，在診斷時(shí)檢測(cè)人員可采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)進(jìn)行診斷。如果送檢樣品為血清，檢測(cè)人員則可以采用酶聯(lián)吸附試驗(yàn)，而不需要采用動(dòng)物接種試驗(yàn)與病毒分離鑒定方法。