雞西市實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀廠(chǎng)家
發(fā)布時(shí)間:2023-01-17 01:35:00
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熱啟動(dòng)Taq酶產(chǎn)品優(yōu)勢(shì);1. 靈敏度高:可直接擴(kuò)增1個(gè)拷貝的支原體DNA。2. 化學(xué)修飾,無(wú)動(dòng)物性DNA污染。3. 性?xún)r(jià)比高:相對(duì)市面上zui常用的熱啟動(dòng)聚合酶性?xún)r(jià)比更高。4. 擴(kuò)增效率高:熒光定量PCR起峰快,Ct值低,擴(kuò)增效率高。5. 可重復(fù)性高:熒光定量PCR擴(kuò)增曲線(xiàn)重合度高,受干擾影響少。熱啟動(dòng)Taq酶應(yīng)用:1. 熱啟動(dòng)PCR 2. 熒光定量PCR 3. DNA序列測(cè)定4. TA cloning.

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PCR產(chǎn)品占據(jù)分子診斷的主要市場(chǎng),基因芯片是分子診斷市場(chǎng)發(fā)展的主要趨勢(shì)。PCR產(chǎn)品靈敏度高、特異性強(qiáng)、診斷窗口期短,可進(jìn)行定性、定量檢測(cè),可廣泛用于肝炎、性病、肺感染性疾病、優(yōu)生優(yōu)育、遺傳病基因、腫瘤等,填補(bǔ)了早期免疫檢測(cè)窗口期的檢測(cè)空白,為早期診斷、早期治療、安 全用血提供了有效的幫助。基因芯片是分子生物學(xué)、微電子、計(jì)算機(jī)等多學(xué)科結(jié)合的結(jié)晶,綜合了多種現(xiàn)代高精尖技術(shù),被專(zhuān)家譽(yù)為診斷行業(yè)產(chǎn)品。但其成本高、開(kāi)發(fā)難度大,產(chǎn)品種類(lèi)很少,只用于科研和藥物篩選等用途。

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分子診斷的主要技術(shù)有核酸分子雜交、聚合酶鏈反應(yīng)和生物芯片技術(shù)。1.核酸分子雜交技術(shù) 具有一定互補(bǔ)序列和核苷酸單鏈在液相或固相中按堿基互補(bǔ)配對(duì)原則締合成異質(zhì)雙鏈的過(guò)程,稱(chēng)為核酸分子雜交。雜交的雙方是待測(cè)核酸序列和探針序列。應(yīng)用該技術(shù)可對(duì)特定DNA或RNA序列進(jìn)行定性或定量檢測(cè)。2.聚合酶鏈反應(yīng)(即Polymerase chain reaction,PCR)原理:PCR是模板DNA,引物和四種脫氧核糖核昔三磷酸(dNTP)在DNA聚合酶作用下發(fā)生酶促聚合反應(yīng),擴(kuò)增出所需目的DNA。包括三個(gè)基本步驟:雙鏈DNA模板加熱變性成單鏈(變性);在低溫下引物與單鏈DNA互補(bǔ)配對(duì)(退火);在適宜溫度下TapDNA聚合酶催化引物沿著模板DNA延伸。3.生物芯片技術(shù)是近年發(fā)展起來(lái)的分子生物學(xué)與微電子技術(shù)相結(jié)合的核酸分析檢測(cè)技術(shù)。起初的生物芯片技術(shù)主要目標(biāo)是用于DNA序列測(cè)定、基因表達(dá)譜鑒定和基因突變體檢測(cè)和分析,所以又稱(chēng)為DNA芯片或基因芯片技術(shù)。由于這一技術(shù)已擴(kuò)展至免疫反應(yīng)、受體結(jié)合等非核酸領(lǐng)域,出現(xiàn)了蛋白質(zhì)芯片、免疫芯片、細(xì)胞芯片、組織芯片等,所以改稱(chēng)生物芯片技術(shù)更符合發(fā)展趨勢(shì)。

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熱啟動(dòng)酶是耐高溫的依賴(lài)于DNA模板的DNA聚合酶,來(lái)源于嗜熱的嗜熱水生菌Thermus aquaticus YT一1,一般應(yīng)用于PCR反應(yīng)。TaqDNA聚合酶是一種M92+依賴(lài)酶,反應(yīng)體系中須有Mg2+存在,然而保持適當(dāng)?shù)腗g2+濃度十分重要,因?yàn)镸g2+濃度過(guò)高或過(guò)低均會(huì)影響引物與模板的結(jié)合、模板與PCR產(chǎn)物的解鏈溫度、引物二聚體的形成以及酶的活性與精 確性。